1. TP nº 7 : action des UV sur une souche de levures.
  2.  

    L’exposition au rayonnement solaire peut provoquer des changements d’aspects des cellules de la peau. Dans certains cas, des cellules modifiées se multiplient de façon anarchique et sont responsables d’un cancer, le mélanome. Pour limiter le risque, on conseille de protéger la peau contre les rayonnements ultra violets.

    On va essayer d’expliquer cette action des UV sur les cellules.

    1. Irradiation d’une souche de levures.
      1. Principe.
      2. Nous allons utiliser une souche de levures qui normalement sont légèrement colorées en rose et qui donnent des colonies rouges.

        Nous disposons d’ une suspension à environ 10000cellules par ml.

        Nous allons mettre en culture ces levures dans des boîtes de Pétri contenant un milieu de culture adéquat, ces boîtes seront ensuite soumises à l’action des UV.

        Nous ne voulons cultiver dans ces boîtes que des levures il va donc falloir manipuler en conditions d’asepsie.

      3. Manipulations.

Le travail se fait autour du bec Bunsen qui doit rester allumé en permanence : de cette

façon les micro-organismes de l’atmosphère sont entraînés vers le haut par le courant d’air chaud et ne risquent pas de se déposer sur le matériel utilisé.

Tout le matériel est disposé autour du bec Bunzen dans un cercle d’une vingtaine de centimètres de rayon.

Ne pas laisser d’alcool à proximité du bec Bunsen.

Au cours de la manipulation il faut éviter de parler et de faire des mouvements brusques provoquant des courants d’air pour ne pas projeter de micro-organismes.

    1. prélever O,1ml de la suspension avec le compte-gouttes et le
    2. déposer au centre de la boite.
    3. L’étaler avec l’ ensemenceur.
    1. Résultat de l’ensemencement d’un milieu.
    2. Lors de la préparation de la boîte témoin : on prélève 0,1 ml de suspension à 104 levures par ml que l’on dépose au centre de la boîte de Pétri. Ces boîtes vont être placées à l’étuve à 30 °C. Le résultat sera observé la semaine prochaine.

      Q 1 : Comment d’après vous se présentera le contenu de la boite témoin ?

    3. Résultat de l’exposition aux UV.
    4. Les boîtes de Pétri préparées précédemment ont été soumises à des rayonnements UV pendant des durées croissantes avant d’être placées à l’étuve pendant trois jours. On a utilisé une souche de levures dont les colonies sont normalement colorées en rouge

      Q2 : Décrire l’aspect des différentes colonies obtenues. (voir photo )

      Compter les colonies, justifier leur nombre.

      Q3 : Que peut-on dire des cellules appartenant à une des colonies ?

      Certaines colonies sont différentes d’aspect :

      Le tableau donne la proportion de colonies différentes d’aspects en fonction de la durée d’éclairement aux U.V de chaque boite.

      nombre total de colonies          
      nombre de colonies blanches          

      % de colonies mutantes

       

             

      Durés d’exposition aux UV (secondes)

      0

      15

      30

      60

      120

       

      Q4 : Tracer le graphique : % de souches différentes en fonction de la durée d’exposition.

      Q5 : Conclure sur le rôle des UV.

      Q6 : Proposer une explication de cet effet.

      Q7 : Le document ci contre donne les propriétés d’absorption de l’ADN aux différentes longueurs d’ondes. Cela vous permet-il de préciser votre hypothèse ?

    5. Etude de documents : le mélanome.

Q 8 : Par une étude de méthodique des données ci-dessous trouvez les différents facteurs favorisant l’apparition du mélanome.

Précisez la réponse en utilisant les résultats du TP et vos connaissances.

localité

Incidence( nouveaux cas pour 100 000 personnes)

Latitude en degrés

Angleterre

3,O

De 50à 55 N

France

3,8

45 N

Australie

50

De 10 à 40 S

Los Angeles(Blancs)

11,6

34 N

Los Angeles(Japonais)

0,6

 

Los Angeles(Noirs)

1,5

 

Aborigènes d’Australie :incidence très faible.

voir corrigé